準確讀取DNA分子中鹼基的排列順序是現代遺傳學的基礎。 DNA定序可以確定DNA鏈上腺嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶和鳥嘌呤的排列順序。早期方法使用鏈終止核苷酸；而目前的技術可以產生大量並行資料。

桑格定序對於特定區域的分析仍然十分有效。新一代定序平台能夠同時對數百萬個片段進行定序，從而實現全基因組和全外顯子組分析。定序結果與參考基因組進行比對，以辨識變異。

臨床實驗室利用定序技術診斷罕見疾病、指導癌症治療和鑑定病原體。成本已大幅下降，使得大規模項目成為可能。準確性、定序深度和生物資訊學解讀決定了結果的臨床應用價值。

• 確定DNA中核苷酸順序的過程
• 包括桑格法和下一代方法
• 辨識相對於參考序列的變異
• 對診斷和研究至關重要