在大规模并行计算机出现之前，DNA序列的读取是逐个片段进行的。桑格测序法使用链终止双脱氧核苷酸生成嵌套的DNA链，这些链在所有可能的末端位置终止。当按大小分离这些片段后，就可以推断出碱基的排列顺序。

四个终止子分别携带不同的荧光染料。毛细管电泳仪检测片段通过激光照射时末端碱基的颜色，从而生成彩色峰色谱图。该方法对约一千个碱基以内的读取具有很高的准确性。

尽管新一代测序平台目前在大型项目中占据主导地位，但桑格测序仍然是验证单个变异和对短靶向区域进行测序的金标准。许多临床实验室仍然依赖桑格测序，因为它具有可靠性高且结果易于解读的特点。

• 经典链终止测序方法
• 使用荧光双脱氧核苷酸
• 能够生成准确且长度适中的文本。
• 仍用于验证和目标分析