Înainte de mașinile masiv paralele, secvența de ADN era citită fragment cu fragment. Secvențierea Sanger utilizează dideoxinucleotide care termină lanțul pentru a genera seturi imbricate de catene de ADN care se termină în fiecare poziție posibilă. Când fragmentele sunt separate după dimensiune, se poate deduce ordinea bazelor.

Fiecare dintre cei patru terminatori poartă un colorant fluorescent diferit. Un instrument de electroforeză capilară detectează culoarea bazei finale pe măsură ce fragmentele trec printr-un laser, producând o cromatogramă cu vârfuri colorate. Metoda este foarte precisă pentru citiri de până la aproximativ o mie de baze.

Deși platformele de generație următoare domină acum proiectele mari, secvențierea Sanger rămâne standardul de aur pentru validarea variantelor individuale și secvențierea regiunilor țintă scurte. Multe laboratoare clinice se bazează încă pe aceasta pentru fiabilitatea și interpretarea simplă.

• Metoda clasică de secvențiere a terminării lanțului
• Folosește dideoxinucleotide fluorescente
• Produce citiri precise de lungime moderată
• Încă utilizat pentru validare și analiză țintită