قبل ظهور أجهزة التوازي الضخمة، كانت قراءة تسلسل الحمض النووي تتم قطعةً قطعة. أما تقنية سانجر، فتستخدم ثنائيات ديوكسي نيوكليوتيدات لإنهاء السلسلة، مما يُنتج مجموعات متداخلة من خيوط الحمض النووي تنتهي عند كل موضع ممكن. وعند فصل القطع حسب الحجم، يُمكن استنتاج ترتيب القواعد.
يحمل كل من النهايات الأربعة صبغة فلورية مختلفة. يكشف جهاز الفصل الكهربائي الشعيري لون القاعدة الأخيرة عند مرور الشظايا عبر شعاع ليزر، مما ينتج عنه مخطط كروماتوغرافي للقمم الملونة. تتميز هذه الطريقة بدقة عالية لقراءات تصل إلى ألف قاعدة تقريبًا.
على الرغم من هيمنة منصات الجيل التالي على المشاريع الكبيرة، إلا أن تقنية سانجر للتسلسل لا تزال المعيار الذهبي للتحقق من صحة المتغيرات الفردية وتسلسل المناطق المستهدفة القصيرة. ولا تزال العديد من المختبرات السريرية تعتمد عليها لموثوقيتها وسهولة تفسير نتائجها.
- طريقة التسلسل الكلاسيكية لإنهاء السلسلة
- يستخدم ثنائي ديوكسي نيوكليوتيدات فلورية
- يُنتج قراءات دقيقة ذات طول متوسط
- لا تزال تستخدم للتحقق والتحليل المستهدف
Comments
No comments yet. Be the first to share a thought.
Leave a comment