Trước khi có các máy tính song song quy mô lớn, trình tự DNA được đọc từng đoạn một. Phương pháp giải trình tự Sanger sử dụng các dideoxynucleotide kết thúc chuỗi để tạo ra các chuỗi DNA lồng nhau, kết thúc ở mọi vị trí có thể. Khi các đoạn được phân tách theo kích thước, thứ tự các bazơ có thể được suy ra.
Mỗi trong bốn đoạn kết thúc mang một loại thuốc nhuộm huỳnh quang khác nhau. Một thiết bị điện di mao dẫn phát hiện màu sắc của base cuối cùng khi các mảnh đi qua tia laser, tạo ra một sắc ký đồ gồm các đỉnh màu. Phương pháp này có độ chính xác cao đối với các phép đo lên đến khoảng một nghìn base.
Mặc dù các nền tảng thế hệ mới hiện đang chiếm ưu thế trong các dự án lớn, giải trình tự Sanger vẫn là tiêu chuẩn vàng để xác nhận các biến thể riêng lẻ và giải trình tự các vùng mục tiêu ngắn. Nhiều phòng thí nghiệm lâm sàng vẫn dựa vào phương pháp này vì độ tin cậy và khả năng diễn giải dễ dàng.
- Phương pháp giải trình tự kết thúc chuỗi cổ điển
- Sử dụng dideoxynucleotide huỳnh quang
- Tạo ra các bản đọc chính xác với độ dài vừa phải.
- Vẫn được sử dụng để xác thực và phân tích mục tiêu.
Comments
No comments yet. Be the first to share a thought.
Leave a comment