Western blot 是一種檢測樣本中特定蛋白質的方法。它首先根據蛋白質的大小分離蛋白質，然後將其轉移到膜上，並用抗體進行檢測。結果會在與蛋白質分子量對應的位置出現一條條帶。如果出現條帶，則表示樣本中存在該蛋白質；如果未出現條帶，則表示樣本中不存在該蛋白質。原理雖然簡單，但實際操作步驟多，容易出錯。

該方法包含多個步驟。首先從細胞或組織中提取蛋白質並進行變性處理。然後將變性後的蛋白質上樣至聚丙烯醯胺凝膠，並以電泳進行分離。之後，將蛋白質轉移至硝酸纖維素膜或聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。封閉膜以防止非特異性結合。一抗與目標蛋白結合。二抗（通常與酵素或螢光染料偶聯）與一抗結合。最後加入底物，並透過膠片或成像系統檢測訊號。

蛋白質印跡法用於確認蛋白質的存在、比較不同樣本間的表達量、檢測翻譯後修飾。它廣泛應用於科研和臨床診斷，包括HIV確診試驗和萊姆病檢測。此外，它還用於驗證抗體活性和檢測脫靶效應。

這項技術充其量只能算是半定量方法。它需要嚴格的對照和標準化。它耗時且操作繁瑣。但它仍然是分子生物學中的一種標準工具。