DNA-fragmenter av ulik lengde kan separeres med et elektrisk felt. Gelelektroforese trekker ladede molekyler gjennom en porøs gelmatrise; mindre fragmenter migrerer raskere enn større. Resultatet er en serie bånd som avslører størrelsene som er tilstede i en prøve.
Agarosegeler brukes til større DNA-biter; polyakrylamidgeler skiller mindre fragmenter. DNA visualiseres med fluorescerende fargestoffer eller flekker. Sammenligning med en størrelsesstandard muliggjør estimering av fragmentlengde. Teknikken ligger til grunn for restriksjonskartlegging, PCR-analyse og kvalitetskontroll av sekvenseringsbiblioteker.
Selv om den i stor grad er erstattet av kapillær- og mikrofluidiske metoder for arbeid med høy gjennomstrømning, er slab-gel-elektroforese fortsatt et enkelt og rimelig undervisnings- og forskningsverktøy. Riktig spenning, gelkonsentrasjon og kjøretid bestemmer oppløsningen. Metoden er grunnleggende i molekylærbiologiske laboratorier.
- Separerer DNA-fragmenter etter størrelse
- Bruker elektrisk felt og porøs gel
- Mindre fragmenter reiser lenger
- Visualisert med fluorescerende fargestoffer
Comments
No comments yet. Be the first to share a thought.
Leave a comment