過去,一滴血或犯罪現場的一小塊血跡所含的DNA量太少,無法進行分析。聚合酶鍊式反應(PCR)改變了這個現狀,它能在幾個小時內擴增出數百萬份目標DNA片段。此方法透過加熱分離DNA鏈、冷卻使短引子結合、再次加熱,並利用耐熱聚合酶合成新的DNA鏈來進行分析。
每個循環都會使目標序列擴增一倍,從而產生指數級增長。研究人員選擇位於目標區域兩側的引物,確保只有該片段被擴增。現代儀器可以自動控制溫度變化,並在不到一小時內完成一次擴增。所得DNA純度足以用於定序、克隆或診斷測試。
PCR技術是法醫鑑定、傳染病檢測和無數研究方案的基礎。定量PCR等變體可以測量反應開始時模板的含量。污染始終是一個需要關注的問題,因為即使是少量遊離分子也可能被擴增。嚴謹的操作技術和陰性對照能夠確保結果的可靠性。
- 以指數級方式擴增特定DNA片段
- 利用反覆的加熱和冷卻循環
- 需要引子和耐熱聚合酶
- 對診斷和分子研究至關重要
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