Egyetlen csepp vér vagy egy halvány helyszíni folt korábban túl kevés DNS-t tartalmazott az elemzéshez. A polimeráz láncreakció, vagy PCR, ezt megváltoztatta azáltal, hogy néhány óra alatt több millió másolatot készített egy kiválasztott DNS-szegmensről. A módszer a szálak szétválasztásához szükséges melegítésből, a rövid primerek kötődéséhez szükséges hűtésből, majd az újabb melegítésből áll, hogy a hőstabil polimeráz új szálakat építsen.
Minden ciklus megduplázza a célpontot, exponenciális növekedést eredményezve. A kutatók olyan primereket választanak, amelyek a kérdéses régiót határolják, biztosítva, hogy csak az adott szakasz amplifikálódjon. A modern gépek automatizálják a hőmérséklet-eltolásokat, és egy órán belül képesek befejezni a futtatást. A kapott DNS elég tiszta a szekvenáláshoz, klónozáshoz vagy diagnosztikai tesztekhez.
A PCR az igazságügyi azonosítás, a fertőző betegségek kimutatása és számtalan kutatási protokoll alapját képezi. Az olyan variánsok, mint a kvantitatív PCR, azt mérik, hogy mennyi templát volt jelen a kezdeti fázisban. A szennyeződés továbbra is állandó aggodalomra ad okot, mivel akár néhány kóbor molekula is amplifikálható. A gondos technika és a negatív kontrollok megbízható eredményeket biztosítanak.
- Exponenciálisan amplifikálja a specifikus DNS-szegmenseket
- Ismétlődő fűtési és hűtési ciklusokat használ
- Primereket és hőstabil polimerázt igényel
- Nélkülözhetetlen a diagnosztikához és a molekuláris kutatáshoz
Comments
No comments yet. Be the first to share a thought.
Leave a comment