एक समय था जब खून की एक बूंद या अपराध स्थल पर मिले हल्के दाग में विश्लेषण के लिए पर्याप्त मात्रा में डीएनए नहीं होता था। पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) ने इस स्थिति को बदल दिया और कुछ ही घंटों में डीएनए के चुने हुए खंड की लाखों प्रतियां बना दीं। इस विधि में कई चरण होते हैं: स्ट्रैंड्स को अलग करने के लिए गर्म करना, छोटे प्राइमर को बांधने के लिए ठंडा करना और फिर से गर्म करना ताकि एक ऊष्मा-स्थिर पॉलीमरेज़ नए स्ट्रैंड्स का निर्माण कर सके।
प्रत्येक चक्र लक्ष्य को दोगुना कर देता है, जिससे घातीय वृद्धि होती है। शोधकर्ता ऐसे प्राइमर चुनते हैं जो रुचि के क्षेत्र के दोनों ओर स्थित होते हैं, यह सुनिश्चित करते हुए कि केवल उसी हिस्से का प्रवर्धन हो। आधुनिक मशीनें तापमान परिवर्तन को स्वचालित करती हैं और एक घंटे से भी कम समय में प्रक्रिया पूरी कर सकती हैं। परिणामी डीएनए अनुक्रमण, क्लोनिंग या नैदानिक परीक्षणों के लिए पर्याप्त रूप से शुद्ध होता है।
पीसीआर फोरेंसिक पहचान, संक्रामक रोगों का पता लगाने और अनगिनत अनुसंधान प्रक्रियाओं का आधार है। क्वांटिटेटिव पीसीआर जैसे प्रकार यह मापते हैं कि शुरुआत में टेम्पलेट की कितनी मात्रा मौजूद थी। संदूषण एक निरंतर चिंता का विषय बना रहता है क्योंकि कुछ बिखरे हुए अणु भी प्रवर्धित हो सकते हैं। सावधानीपूर्वक तकनीक और नकारात्मक नियंत्रण परिणामों को विश्वसनीय बनाए रखते हैं।
- यह विशिष्ट डीएनए खंडों को तेजी से बढ़ाता है।
- यह बार-बार गर्म करने और ठंडा करने के चक्रों का उपयोग करता है।
- इसके लिए प्राइमर और ऊष्मा-प्रतिरोधी पॉलीमरेज़ की आवश्यकता होती है।
- निदान और आणविक अनुसंधान के लिए आवश्यक
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