Fazer muitas cópias idênticas de um segmento específico de ADN é uma prática de rotina em biologia molecular. A clonagem de genes consiste em inserir um gene de interesse num vetor, geralmente um plasmídeo, e introduzir essa construção numa célula hospedeira que replica o ADN. O resultado é uma preparação pura e amplificada do gene.
As enzimas de restrição e a DNA ligase criam moléculas recombinantes. As bactérias transformadas são selecionadas com marcadores de resistência a antibióticos. Uma vez clonado, o gene pode ser sequenciado, expresso como proteína ou utilizado em experiências subsequentes. A clonagem de ADN complementar parte do ARN mensageiro e captura sequências expressas.
A clonagem é fundamental para a produção de proteínas recombinantes, organismos transgénicos e muitos testes de diagnóstico. Os métodos modernos utilizam frequentemente a amplificação por PCR ou ADN sintético, mas a clonagem clássica continua a ser uma competência essencial em laboratório. Uma verificação cuidadosa garante que a sequência clonada corresponde à original.
- Produção de múltiplas cópias idênticas de um gene
- Utiliza vetores e células hospedeiras.
- Permite estudos ou expressões adicionais.
- Fundamentos da tecnologia do ADN recombinante
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