特定のDNA断片の同一のコピーを多数作成することは、分子生物学では日常的に行われている。遺伝子クローニングでは、目的の遺伝子をベクター(通常はプラスミド)に挿入し、その構築物を宿主細胞に導入してDNAを複製させる。その結果、純粋で増幅された遺伝子標本が得られる。
制限酵素とDNAリガーゼによって組換え分子が作られる。形質転換された細菌は抗生物質耐性マーカーを用いて選別される。クローン化された遺伝子は、配列決定、タンパク質としての発現、またはさらなる実験に利用できる。相補的DNAクローニングはメッセンジャーRNAから始まり、発現配列を捕捉する。
クローニングは、組換えタンパク質生産、遺伝子組み換え生物、および多くの診断検査の基盤となっている。現代の手法ではPCR増幅や合成DNAがよく用いられるが、古典的なクローニングは依然として実験室における重要な技術である。綿密な検証によって、クローン化された配列が元の配列と一致することが保証される。
- 複数の同一遺伝子コピーの生成
- ベクターと宿主細胞を使用する
- さらなる研究や表現を可能にする
- 組換えDNA技術の基礎
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