Genkloning skapar kopior av en specifik gen. Det är inte samma sak som att klona en organism. Det är en molekylärbiologisk teknik som används för att isolera en gen, infoga den i en vektor och sprida den i en värdcell. Resultatet är många identiska kopior av genen, vilka kan studeras, sekvenseras eller användas för att producera ett protein.
Processen har flera steg. Genen amplifieras med PCR eller skärs från en större DNA-molekyl med restriktionsenzymer. Den sätts in i en vektor, vanligtvis en plasmid, med hjälp av ligas. Vektorn introduceras i en värdcell, ofta E. coli, genom transformation. Värdcellen multipliceras, och plasmiden replikerar med den. Celler som innehåller plasmiden selekteras, vanligtvis med en antibiotikaresistensmarkör. Genen isoleras sedan från värdcellerna.
Genkloning används för att producera insulin, tillväxthormon och andra terapeutiska proteiner. Det används för att studera genfunktion genom att uttrycka genen i en modellorganism. Det används för att skapa genetiskt modifierade grödor och djur. Det är en grundläggande teknik inom bioteknik.
Tekniken är inte utan utmaningar. Vissa gener är svåra att klona eftersom de är toxiska för värden eller instabila. Andra kräver speciella vektorer eller värdstammar. Men för de flesta gener är kloning rutinmässigt. Det är det första steget i många experiment.
Comments
No comments yet. Be the first to share a thought.
Leave a comment