الاستجابة غير المشروطة هي رد فعل فطري وغير مكتسب تجاه مثير غير مشروط. وهي السلوك التلقائي الذي يربطه التكييف الكلاسيكي لاحقاً بإشارة جديدة.

يُعدّ إفراز اللعاب استجابةً للطعام في الفم مثالًا كلاسيكيًا. لا تتطلب هذه الاستجابة أي تدريب مسبق، فهي جزء من القدرات البيولوجية للكائن الحي. تشمل الاستجابات غير المشروطة الأخرى رمش العين عند نفخة هواء، والانسحاب من الألم، وردة الفعل المفاجئة عند سماع صوت عالٍ. في تجارب التكييف، تُشكّل الاستجابة غير المشروطة رد الفعل الأساسي الذي سيُثيره المُثير المشروط لاحقًا.

يمكن أن تتأثر قوة وشكل الاستجابة غير المشروطة بالحالة التحفيزية والإرهاق والأدوية، إلا أن جوهرها الأساسي لا يزال غير مكتسب. يسمح قياس الاستجابة غير المشروطة للباحثين بالتأكد من فعالية المحفز غير المشروط ومقارنته بالاستجابة المشروطة اللاحقة.

إن رد الفعل الذي يحدث بشكل طبيعي، دون تدريب، هو الاستجابة غير المشروطة.