ELISA to skrót od testu immunoenzymatycznego (enzyme-linked immunosorbent assay). Jest to podstawowy test diagnostyki medycznej. Wykrywa białka, przeciwciała i inne cząsteczki za pomocą przeciwciał połączonych z enzymami. W obecności cząsteczki docelowej enzym reaguje z substratem, powodując zmianę koloru. Intensywność koloru wskazuje na obecność cząsteczki docelowej. Jest to prosty, czuły i tani test.
Test jest dostępny w kilku formatach. W bezpośrednim teście ELISA antygen jest immobilizowany na płytce i wykrywany za pomocą przeciwciała sprzężonego z enzymem. W pośrednim teście ELISA przeciwciało pierwszorzędowe wiąże antygen, a drugorzędowe przeciwciało sprzężone z enzymem wiąże przeciwciało pierwszorzędowe. W teście kanapkowym ELISA antygen jest wychwytywany pomiędzy dwoma przeciwciałami, co poprawia swoistość. W kompetycyjnym teście ELISA antygen docelowy konkuruje ze znakowaną wersją o miejsca wiązania.
Test ELISA służy do diagnozowania HIV, zapalenia wątroby, boreliozy i wielu innych infekcji. Służy do pomiaru hormonów, cytokin i markerów nowotworowych. Jest stosowany w bezpieczeństwie żywności do wykrywania alergenów i zanieczyszczeń. Jest również wykorzystywany w badaniach naukowych do ilościowego oznaczania białek w próbkach. Jest to jeden z najpowszechniej stosowanych testów na świecie.
Technika ta nie jest doskonała. Może dawać zarówno fałszywie dodatnie, jak i fałszywie ujemne wyniki. Może wystąpić reaktywność krzyżowa. Wymaga starannej optymalizacji i walidacji. Pozostaje jednak podstawą diagnostyki, ponieważ jest skuteczna.
Comments
No comments yet. Be the first to share a thought.
Leave a comment